Reaksi Rantai Polimerase (PCR) dan Ujian STD

Posted on
Pengarang: Virginia Floyd
Tarikh Penciptaan: 7 Ogos 2021
Tarikh Kemas Kini: 12 Mungkin 2024
Anonim
PCR (Polymerase Chain Reaction) Explained
Video.: PCR (Polymerase Chain Reaction) Explained

Kandungan

Analisis tindak balas rantai polimerase (PCR) adalah teknik makmal. Tujuan ujian PCR adalah untuk mencari sejumlah kecil DNA dalam sampel, menggunakan proses yang dikenal sebagai penguat. Semasa penguatan PCR, DNA yang menarik disalin berulang kali sehingga ada cukup untuk analisis dan pengesanan. Sebagai contoh, PCR boleh digunakan untuk mengenal pasti sejumlah kecil DNA dari organisma yang menyebabkan gonorea atau klamidia yang terdapat dalam sampel air kencing.

Bagaimana PCR Berfungsi?

Langkah pertama PCR adalah membuat buku asas. Ini adalah urutan pendek DNA yang sesuai dengan hujung sampel DNA yang ingin anda kesan. Mereka adalah muslihat untuk mencari, memperkuat, dan mengesan sekeping DNA tertentu. DNA itu boleh digunakan untuk mengenal pasti patogen. Ia juga boleh digunakan untuk melakukan perkara seperti mengesan gen untuk ketahanan terhadap antibiotik.

Sebaik sahaja anda mempunyai primer, langkah seterusnya dalam PCR adalah memanaskan sampel sehingga DNA untai dua berpisah menjadi dua helai tunggal-ini disebut penolakan. Kemudian buku asasdigabungkan dengan DNA sampel. Selepas ini, DNA polimerase digunakan untuk memulakan replikasi DNA di lokasi primer. Akhirnya, DNA dipanaskan untuk memisahkan helai sekali lagi. Dengan itu, keseluruhan proses PCR bermula lagi.


Jumlah segmen minat DNA yang terdapat dalam sampel meningkat secara eksponen dengan setiap kitaran PCR. Pada kitaran pertama, satu salinan menjadi dua. Kemudian dua salinan menjadi empat, kemudian menjadi lapan, dll. Pertumbuhan eksponensial ini bermaksud, secara amnya, hanya 20 hingga 40 kitaran diperlukan untuk menentukan apakah DNA yang dimaksudkan ada. (Sekiranya DNA ada, 20-40 kitaran juga cukup untuk memberikan sampel yang mencukupi untuk analisis).

Semua langkah tindak balas rantai polimerase-menafikan DNA, menerapkan primer, dan memanjangkan DNA-berlaku pada suhu yang berbeza. Itu bermaksud bahawa setelah campuran awal disatukan, langkah-langkahnya dapat dikendalikan melalui proses yang dikenal sebagai kitar termal. Thermocycling bermaksud suhu ditahan pada tahap yang diperlukan untuk jangka masa yang cukup lama untuk setiap langkah berlangsung. Oleh itu, PCR adalah kaedah yang berkesan untuk meningkatkan jumlah DNA sasaran. Sebenarnya, ia dapat dicapai dalam satu tabung uji dengan sedikit memerlukan campur tangan manusia.


Reaksi rantai polimerase mewakili revolusi dalam teknik biologi ketika pertama kali dikembangkan pada awal 1980-an. Pencipta PCR, Kary Mullis, memenangi Hadiah Nobel Kimia untuk karyanya pada tahun 1993.

Mengapa PCR Berkaitan dengan Ujian STD

Tindak balas rantai polimerase, dan teknik yang berkaitan seperti tindak balas rantai ligase, terbukti semakin penting untuk ujian STD. Ini kerana teknik ini dapat secara langsung mengenal pasti sejumlah kecil DNA virus atau RNA dalam sampel. Mengenal pasti kod genetik patogen tidak memerlukan patogen hidup-tidak seperti budaya bakteria atau budaya virus. Ia juga tidak memerlukan jangkitan itu terjadi sejak lama sebelum orang mengembangkan reaksi antibodi yang dapat dikesan (cara jangkitan dikesan oleh ELISA.) Ini bermaksud teknik PCR kadang-kadang dapat mengesan penyakit lebih awal daripada ujian lain. Lebih baik lagi, STD dapat dikesan tanpa perlu mengambil berat tentang menjaga sampel hidup atau menguji pada waktu yang tepat.


Ujian STD Di Rumah Terbaik